Dosage par Étalonnage de la Vitamine C
Comprendre le Dosage par Étalonnage de la Vitamine C
Dans le cadre d’une étude sur les bienfaits des aliments naturels, vous êtes chargé de déterminer la concentration de vitamine C dans un jus d’orange fraîchement pressé.
Pour cela, vous utiliserez la technique de dosage par étalonnage avec le réactif 2,6-dichlorophénolindophénol (DCPIP), qui se décolore en présence de vitamine C.
Matériel et Réactifs
- Pipettes de 10 mL et 1 mL
- Spectrophotomètre
- Béchers de 100 mL
- Jus d’orange fraîchement pressé
- Solution de DCPIP à 0,1 % préparée dans une solution tampon pH 4
- Solutions étalons de vitamine C à différentes concentrations (0.1 mg/mL, 0.2 mg/mL, 0.3 mg/mL, 0.4 mg/mL, 0.5 mg/mL)
Protocole
- Préparation des Solutions pour la Courbe d’Étalonnage : Utilisez chaque solution étalon de vitamine C pour remplir un cuvette distincte avec 3 mL de solution et ajoutez 2 mL de DCPIP. Mesurez l’absorbance de chaque solution à 520 nm avec le spectrophotomètre.
- Préparation de l’Échantillon de Jus d’Orange : Prenez 10 mL de jus d’orange frais et ajoutez 10 mL d’eau distillée pour diluer l’échantillon.
- Dosage de l’Échantillon : Ajoutez 3 mL de l’échantillon dilué dans une nouvelle cuvette, puis ajoutez 2 mL de DCPIP. Mesurez l’absorbance à 520 nm.
- Utilisation de la Courbe d’Étalonnage : Utilisez les données obtenues avec les solutions étalons pour tracer une courbe d’étalonnage. Déterminez la concentration de vitamine C dans le jus d’orange en utilisant l’absorbance mesurée pour l’échantillon.
Données:
- Absorbances des Solutions Étalons :
- 0.1 mg/mL : 0.15
- 0.2 mg/mL : 0.30
- 0.3 mg/mL : 0.45
- 0.4 mg/mL : 0.60
- 0.5 mg/mL : 0.75
- Absorbance de l’Échantillon de Jus d’Orange : 0.50
Question:
Calculez la concentration de vitamine C dans le jus d’orange frais non dilué. Utilisez la courbe d’étalonnage pour interpréter l’absorbance mesurée et fournir une réponse en mg/mL.
Correction : Dosage par Étalonnage de la Vitamine C
1. Tracer la Courbe d’Étalonnage
Les valeurs d’absorbance obtenues pour chaque concentration de vitamine C permettent de tracer une courbe d’étalonnage.
La relation entre la concentration \(C\) et l’absorbance \(A\) est généralement linéaire pour ce type de dosage.
Les points de données sont :
- \( C = 0.1 \, \text{mg/mL}, A = 0.15 \)
- \( C = 0.2 \, \text{mg/mL}, A = 0.30 \)
- \( C = 0.3 \, \text{mg/mL}, A = 0.45 \)
- \( C = 0.4 \, \text{mg/mL}, A = 0.60 \)
- \( C = 0.5 \, \text{mg/mL}, A = 0.75 \)
Pour déterminer la relation linéaire, nous calculons d’abord la pente \(m\) de la courbe linéaire en utilisant la formule de la pente pour deux points \( (x_1, y_1) \) et \( (x_2, y_2) \):
\[ m = \frac{y_2 – y_1}{x_2 – x_1} \]
Pour les valeurs extrêmes,
\[ m = \frac{0.75 – 0.15}{0.5 – 0.1} \] \[ m = \frac{0.60}{0.4} \] \[ m = 1.5 \]
L’équation de la courbe est donc : \(A = 1.5C\)
2. Utilisation de la Courbe d’Étalonnage pour Déterminer la Concentration
L’absorbance mesurée pour l’échantillon de jus d’orange est 0.50. Utilisons la courbe d’étalonnage pour trouver la concentration correspondante:
\[ 0.50 = 1.5C \] \[ C = \frac{0.50}{1.5} \] \[ C \approx 0.333 \, \text{mg/mL} \]
3. Correction de la Concentration pour la Dilution
Le jus d’orange a été dilué par un facteur de 2 (10 mL de jus + 10 mL d’eau). Ainsi, la concentration réelle dans le jus non dilué est :
\[ C_{\text{réelle}} = 0.333 \times 2 \] \[ C_{\text{réelle}} = 0.666 \, \text{mg/mL} \]
Conclusion
La concentration de vitamine C dans le jus d’orange frais non dilué est de \(0.666 \, \text{mg/mL}\). Cette valeur indique la quantité de vitamine C présente dans le jus et peut être comparée à des valeurs de référence pour évaluer la qualité nutritive du jus.
Dosage par Étalonnage de la Vitamine C
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